内容正文:
微生物的培养技术及应用
第二节
微生物的基本培养技术(二)
(一)微生物的纯培养
由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物,获得纯培养物的过程就是纯培养。
(1)概念:
(2)内容:
1)配制培养基
2)灭菌(培养基和器具)
3)微生物接种
4)分离
5)恒温箱中培养
在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。
特征:
大小、形状、隆起程度、颜色等
功能:
鉴定菌种的重要依据
稀释涂布平板法、平板划线法
获得单菌落的方法
分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,这就是菌落。
菌落:
微生物群
分散或稀释
单个细胞
单个菌落
繁殖
1.制备培养基
酵母菌的纯培养
探究-实践
1)配制培养基
称取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000ml,加热煮沸至马铃薯软烂,用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、15-20g琼脂,用蒸馏水定容至1000ml.
2)灭菌
将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞,包上牛皮纸,并用皮筋勒紧,再放入高压蒸汽灭菌锅中,在压力为100kPa、温度为121℃的条件下,灭菌15-30min.将5-8套培养皿包成一包,用几层牛皮纸包紧,放入干热灭菌箱内,在160-170℃灭菌2h.
包器材
倒平板的具体操作:
3)倒平板
待培养基冷却至50左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。
灭菌后的培养基在无菌操作台上倒入4个培养皿中,倒后立即置于水平位置上,轻轻晃动,使培养基铺满平皿底部,待凝,使之形成平面。
倒平板注意事项:
①温度:50℃左右
②操作:在酒精灯火焰附近
③冷凝后平板倒置
1
2
3
4
1.拔出锥形瓶的棉塞
2.将瓶口迅速通过火焰
3.用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,将培养基(10-20mL)倒入培养皿,立即盖上皿盖
4.等待培养基冷却凝固后,将培养皿倒转过来放置
1.培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?
可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉温度下降到刚刚不烫手即可。
2.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?
最好不要用这个平板培养微生物。
防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
将所倒