1.2 第2课时 微生物的选择培养和计数 课件【新教材】2020-2021学年人教版（2019）高中生物选择性必修三

自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，更难实现，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。该怎么办？ 问题探讨 聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而提取出耐高温的DNA聚合酶。这种酶目前已被广泛用于聚合酶链式反应（PCR） 讨论： 1.筛选水生栖热菌的思路是什么样的？ 2.为什么水生栖热菌能从热泉中筛选出来呢？ 根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找 耐高温的酶 耐高温生物体 高温环境（热泉、火山口） 寻找 寻找 这是因为水生栖热菌能在70-80℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存 现学现用： 1.在被石油污染的土壤中可以筛选________微生物 2.在冰川冻土层可以筛选______微生物 3.漆酶属于木质降解酶类，分离产漆酶菌株的首选样品是生活污水吗？___________ 由以上例子可知，某些微生物适应某些特定的环境条件，而绝大多数微生物在这种条件下不能生存，因此可以通过这个原理从环境中获得某种特定种类的微生物。 实验室中微生物的筛选，可以应用这个原理吗？ 石油分解 耐寒 不是 实验室筛选微生物原理 人为提供_______________的条件（包括_____、_____和_____等），同时_______________________ 有利于目的菌生长 抑制或阻止其他微生物的生长 营养 温度 pH 一、选择培养基 1.概念 在微生物学中，___________的微生物生长，同时________________微生物生长的培养基 2.三种方法 （1）利用营养缺陷进行选择培养 *营养缺陷的微生物不能正常生长 （2）利用添加某种化学物质进行选择培养 *添加杀伤性物质，有抗性的可以生长，无抗性的死亡 （3）利用改变培养条件进行选择培养 *调节温度、pH等生长条件，只有适应的可以生长 允许特定种类 抑制或阻止其他种类 3.实例 （1）目的：分离酵母菌、霉菌等真菌，防止细菌生长 原理：青霉素能抑制细菌生长，对真菌无作用 配制：使用__________的培养基 （2）目的：分离固氮菌 原理：固氮微生物能利用空气中的氮气 配制：使用___________________的培养基 （3）目的：分离自养型微生物 原理：自养型微生物能利用无机碳源 配制：使用_______________________的培养基 （4）目的：分离耐酸菌 原理：耐酸菌能在pH为酸性的条件下生长 配制：使用___________的培养基 加入青霉素 不加氮源（以N2为氮源） 不加有机碳源（以CO2为碳源） 将pH调至酸性 思考·讨论 选择培养基配方的设计 尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可以作为细菌生长的氮源。 讨论： 1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 在选择培养基中，以尿素作为唯一氮源， 只有能合成脲酶的细菌才能生长发育繁殖 除以尿素作为唯一氮源外，该培养基的其他营养成分与普通培养基基本相同 现学现用： 1.从物理性质来讲，两者属于_____培养基， 判断依据是_____________________________； 该类培养基的主要用途为_______________； 2.从用途上来讲，培养基二属于_____培养基， 目的是为了获得__________________； 3.两种培养基共有的培养基成分有：_______________； 培养基一的碳源为_______，氮源为_______； 培养基二的碳源为_______，氮源为_______； 培养基一 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 定容到1000ml 培养基二 KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素CO(NH2)2 1.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到1000ml 固体 添加了凝固剂