内容正文:
发酵工程
第1章
第2节 微生物的培养技术及应用
二 微生物的选择培养和计数
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第1章 发酵工程
生物学 选择性必修3 R
课程内容标准 核心素养对接
1.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。
2.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。
3.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。 1.理解微生物的选择培养和计数的原理。(生命观念)
2.开展稀释涂布平板法的操作和土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验。(科学探究)
栏目索引
预习案 自主读教材
探究案 互动探疑难
巩固案 总结与应用
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第1章 发酵工程
生物学 选择性必修3 R
1.自然界中目的菌株的筛选
(1)依据:根据它对___________的要求,到相应的环境中去寻找。
(2)实例:PCR技术过程中用到的耐高温的_________________,就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。
一、选择培养基
生存环境
Taq DNA聚合酶
预习案 自主读教材
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第1章 发酵工程
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2.实验室中目的菌株的筛选
(1)原理:人为提供有利于___________生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时_____________其他微生物的生长。
(2)方法:利用选择培养基分离。
①选择培养基:允许___________的微生物生长,同时_____________其他种类微生物生长的培养基。
②实例:选择分解尿素的细菌的培养基,以_______作为唯一氮源,只有能合成_______的微生物才能分解尿素。
目的菌株
抑制或阻止
特定种类
阻止或抑制
尿素
脲酶
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第1章 发酵工程
生物学 选择性必修3 R
1.铲取土样,将样品装入纸袋中。
2.将10 g土样加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中,依次等比稀释。
二、微生物的选择培养
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3.稀释涂布平板法
(1)操作步骤
①系列稀释操作
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a.将分别盛有____ mL水的6支试管灭菌,并按101~106的顺序编号。
b.用移液管吸取 ____ mL培养的菌液,注入101倍稀释的试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸3次,使菌液与水充分_______。
c.从101倍稀释的试管中吸取 ____ mL稀释液,注入102倍稀释的试管中,重复b步的混匀操作。依次类推,直到完成最后一支试管的稀释。
9
1
混匀
1
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②涂布平板操作
0.1
酒精
冷却
涂布器
菌液
培养基
转动
待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板_______,放入30~37℃的恒温培养箱中培养1~2 d。在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的_____菌落。
倒置
单
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1.方法一:稀释涂布平板法
(1)原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个_______。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少_______。
(2)计数原则:一般选择菌落数为__________的平板进行计数。样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目。在同一稀释度下,应至少对____个平板进行重复计数,然后求出_________。
(3)注意事项:统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____,这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个_______。
三、微生物的数量测定
活菌
活菌
30~300
3
平均值
少
菌落
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2.方法二:直接计数法
利用显微镜进行直接计数,也是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。该方法利用特定的细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下观察、计数,然后再计算一定体积的样品中微生物的数量,统计的结果一般是_________________的总和。
活菌数和死菌数
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第1章 发酵工程
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1.土壤取样
从富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土壤取样。先铲去表层土,在距地表约 _______ cm的土壤层取样。
2.样品的稀释
(1)稀释原因:样品的_________直接影响平板上生长的___________。
(2)稀释标准:选用一定稀释范围的样品液进行培养,保证获得菌落数在 __________之间,便于计数。
(3)第一次做实验时,可以将稀释度的范围放宽一点。