内容正文:
专题4 酶的研究与应用
课题3 酵母细胞的固定化
【学习目标】
1、认识在应用酶的过程中,存在的实际问题及解决办法。
2、理解高果糖浆及生产高果糖浆的固定化酶技术。
3、掌握固定化技术的方法及适合不同固定方法的材料。
4、掌握固定化酵母细胞的实验操作过程,达到能够进行实际操作。
【课堂导入】
由于酶具有催化效率高、低耗能、低污染等优点,被大规模应用于食品、化工等各个领域。在应用酶的过程中,对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后会混在产物中,可能影响产品质量。于是,有人设想将酶固定在不溶于水的载体上,使酶能够被反复利用,这一节我们将制备固定化酵母细胞,掌握固定化酶的作用。
一、固定化酶和固定化细胞技术
1、固定化酶的应用实例——生产高果糖浆
高果糖浆是指果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品,高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病,对人类的健康更有益。
(1)反应原理:葡萄糖eq \o(――――――→,\s\up17(葡萄糖异构酶))果糖。
(2)生产原理:将酶固定在一种颗粒状的载体(如图中②)上,再将这些酶颗粒装到一个反应柱(如图中①)内,柱子底端装上分布着许多小孔的筛板(如图中③)。酶颗粒无法通过筛板的小孔,而反应溶液却可以自由出入。
(3)高果糖浆的生产生产操作:
①将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入。②使葡萄糖溶液流过反应柱,与固定化葡萄糖异构酶接触。③转化成的果糖,从反应柱的下端流出。
(4)固定化酶技术的优点:与一般酶制剂相比,固定化酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时还可以被反复利用。
2、固定化酶和固定化细胞技术
(1)概念:利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。
(2)常用方法
①包埋法,能将酶或者细胞包埋在不溶于水的多孔性载体中。
②化学结合法,能将酶或者细胞相互连接或者结合到载体上。
③物理吸附法,能将酶或者细胞吸附到载体表面。
(3)固定化酶和固定化细胞的比较
细胞个大,而酶分子很小;个大的细胞难以被吸附或结合,而个小的酶容易从包埋材料中漏出,所以酶更适合采用化学结合和物理吸附法固定化,而细胞多采用包埋法固定化。固定化酶,固定一种酶。固定化细胞可以固定一系列酶。
(4)包埋法载体:包埋法固定化细胞常用的是不溶于水的多孔性载体,如明胶、琼