内容正文:
实验三:体验细胞膜的制备方法
1.材料 新鲜的哺乳动物血液
2.用具 离心机,离心管,滴管,显微镜,载玻片,盖玻片,吸水纸,小烧杯。
3.试剂 柠檬酸钠或肝素(抗凝剂),生理盐水(质量分数为0.9%的NaCl溶液),蒸馏水或清水。
4.操作要点
准备一定量的新鲜的哺乳动物血液,如羊血或猪血,在冰箱中静置一昼夜。用滴管将上清液吸去。再吸取1 mL的沉淀物,放入离心管中,加入生理盐水2 mL,在2 000 r/min条件下离心5 min。去除上清液,在沉淀中再加入生理盐水2 mL,再离心一次,去除上清液,留沉淀备用。以上操作的目的是洗去血浆成分,避免血浆对血细胞的缓冲作用,从而使红细胞的溶血现象更加明显。
学生的实验操作如下。
(1)取一个5 mL的小烧杯,加入生理盐水2~3 mL。
(2)用滴管在沉淀的下层吸取一小滴血细胞,滴入小烧杯的生理盐水中,以达到稀释红细胞的目的,以免观察时,由于细胞密度太大,影响观察效果。
(3)取另一个滴管,在小烧杯中轻轻搅拌,然后吸取少量的血细胞稀释液,在载玻片的中央滴很小的一滴,加盖玻片。
(4)先在低倍镜下观察红细胞的正常形态,可见其边缘完整发亮。
(5)在盖玻片的一侧加一滴蒸馏水或清水,在另一侧非常小心地用吸水纸慢慢地吸引,防止把红细胞全部吸入吸水纸中而影响观察。边加水边观察,注意红细胞的形态变化。红细胞会随着水流向一侧漂移,观察时注意移动玻片。红细胞体积逐渐变大,变得非常鼓胀,在视野中可以找到少数胀破的红细胞,它们已失去完整发亮的边缘,变成弥散状。
5.需要注意的几个问题
(1)制作临时装片时,红细胞必须稀释,而且取红细胞的量要少。
(2)在高倍镜下观察,待观察清晰时,在盖玻片的一侧滴加蒸馏水,同时在另一侧用吸水纸吸引。上述操作均在载物台上进行,并随时调整镜筒高度,持续观察细胞的变化。在盖玻片一侧滴加蒸馏水的量要少,不能让盖玻片处于漂浮状态;同时在另一侧用吸水纸吸引时要小心,不要将血细胞吸走。
(3)要想取得好的观察效果,所用显微镜的放大倍数应在400倍以上。
(4)操作中要认真观察才能看到连续的变化过程。
例1.生物体细胞内的膜具有一定的选择透过性,即水分子可以自由通过,细胞要选择吸收的离子和小分子也可以通过,而其他粒子、小分子和大分子则不能通过。请根据以下所提供的条件,验证细胞内膜的选择透过性。
实验材料和用具:①新鲜的红玫瑰 ②烧杯 ③玻璃铅笔 ④质量分数为15%的盐酸 ⑤清水 ⑥量筒
(1)红玫瑰的红色与细胞的哪一结构有关?__________________________。
(2)完善下列实验设计,验证活细胞的膜具有选择透过性
第一步:选两只相同的烧杯,用玻璃铅笔标上A和B
第二步:__________________________________________________________________,
第三步:_________________________________________________________________________。
结果预测:_________________________________________________________________________。
原因分析:_________________________________________________________________________。
(3)此实验主要能验证哪些膜的选择透过性?______________________________。
【答案】液泡 在A、B两只烧杯中,分别加入等量的15%的盐酸和清水 选等量的红色玫瑰花瓣,分别放入A、B两只烧杯中,经过一段时间后观察 水中的花瓣仍为红色,水为无色;盐酸中的花瓣颜色逐渐变浅,而盐酸溶液变红 盐酸将细胞杀死,膜丧失其选择性,而清水对细胞活性无伤害作用 细胞膜和液泡膜
【解析】
试题分析:根据实验设计遵循的单一变量原则、对照原则等,围绕题意准确定位该实验是探究性实验还是验证性实验以及实验目的,据此找出实验变量(自变量、因变量、无关变量),进而完善实验步骤并得出相应的结论。
(1) 红玫瑰的红色与液泡中含有的色素有关。
(2)依题意可知:本实验的目的是验证活细胞的膜具有选择透过性,因此该实验的自变量是细胞是否有活性,因变量是细胞所处的水溶液是否变红,其它对实验结果有影响的因素均为无关变量,应控制相同且适宜。
依据实验设计遵循的原则、已经给出的实验材料和用具以及不完整实验步骤可知:第二步,应在A、B两只烧杯中,分别加入等量的15%的盐酸和清水;第三步,选等量的红色玫瑰花瓣,分别放入A、B两只烧杯中,经过一段时间后观察。