内容正文:
分解纤维素的微生物的分离
【学习目标】
1、了解纤维素与纤维素酶。
2、理解纤维素分解菌的筛选原理。(重点)
3、简述从土壤中分离出分解纤维素的微生物的方法。
一、纤维素分解菌的筛选的原理
1、纤维素
纤维素是一种由 首尾相连而成的 化合物,是地球上含量最丰富的多糖类物质。 是自然界中纤维素含量最高的天然产物。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用,这是因为它们能够产生 。
葡萄糖
高分子
棉花
纤维素酶
(1)元素组成: 三种元素。
(2)组成单体: 。
(3)种类:除天然纤维素外,还有水溶性的 、不溶于水的 等。
C、H、O
葡萄糖
羧甲基纤维素钠
微晶纤维素
2、纤维素酶
(1)组成:纤维素酶是一种 ,它至少包括三种组分,包括 、 和 三种组分。
(2)作用
纤维素―――――――→纤维二糖―――――――→葡萄糖
C1酶、CX酶
葡萄糖苷酶
(3)实验验证
纤维素酶水解滤纸实验
复合酶
C1酶
CX酶
葡萄糖苷酶
试管 滤纸条 缓冲溶液 纤维素酶(70~80 U/mL) 条件 结果
1 1×6 cm pH=4.8的0.1 mol/L醋酸—醋酸钠缓冲溶液10 mL 1 mL 两试管固定在50 mL锥形瓶中,在摇床上以140 r/min的转速振荡反应1 h 时间足够长,滤纸被完全分解
2 1×6 cm pH=4.8的0.1 mol/L醋酸—醋酸钠缓冲溶液11 mL 基本无变化
①1个酶活力单位是指在温度为25 ℃,其他反应条件最适宜情况下,在1 min内转化1_mmol的底物所需要的酶量。
②实验是如何构成对照的?
答案 在一支试管中添加纤维素酶,另一支试管不添加纤维素酶;尽管醋酸-醋酸钠缓冲液用量不同,但都能维持相同的pH。
3.纤维素分解菌的筛选
(1)方法:刚果红染色法。
常用的有两种方法,一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应;另一种是在倒平板时就加入刚果红。
(2)原理:刚果红+