1.1 DNA重组技术的基本工具 课件 人教版高中生物选修三

专题1 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具 一、 教学目标 1.简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用。 2.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。 二、 教学重点和难点 1.教学重点 DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。 2.教学难点 基因工程载体需要具备的条件。 工具和工具酶的区别 分子水平（如生物大分子：蛋白质）小于细胞水平（包括对细胞个体及细胞器的操作）小于个体水平（生物个体）； 基因工程是在基因水平上的操作，与DNA有关，细胞工程是对细胞的操作（如杂交瘤细胞） 回忆什么是基因工程？ 原理是？操作水平是？ 基因工程需要什么工具？ 手术刀——？ 缝合针——？ 运输工具——？ 限制性核酸内切酶——分子手术刀 限制酶 来源：原核生物 细菌等单细胞生物容易受到自然界外源DNA（如噬菌体）的入侵。这类原核生物之所以长期进化而不灭绝，限制酶可能有什么作用？ 切割外源DNA，使之失效 切割位点 切割外源DNA，使之失效 末端 切割位点位于中轴线两侧 切割位点位于中轴线上 下列关于限制酶的说法正确的是(　　) A．限制酶主要是从真核生物中分离纯化出来的 B．一种限制酶通常只能识别一种特定的核苷酸序列 C．不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端 D．限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键 B 答案　B 解析　限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，A项错误；DNA分子经限制酶切割后形成黏性末端或平末端，C项错误；限制酶的作用部位是双链DNA分子特定核苷酸之间的磷酸二酯键，D项错误。 DNA连接酶——分子缝合针 DNA连接酶 作用：连接两条DNA链，恢复磷酸二酯键 E. coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 来自大肠杆菌 来自T4噬菌体 种类： 区别： 连接黏性末端 连接黏性末端和平末端（效率低） DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事吗？ 共同点： 不同点： 1、连接对象不同 2、模板需求不同 形成磷酸二酯键 DNA聚合酶 需要模板 将单个核苷酸加到已有核酸片段的末端 引发酶（英语：primase，或译为引子酶，引物酶）是指在DNA复制的起始阶段合成单链RNA引物的RNA聚合酶，引物合成后，DNA聚合酶会沿着引物继续合成单链DNA（延伸），此后RNA引物片段会被外切酶5'到3'方向切除。 引发酶催化一个称为引物的短RNA（或某些生物的DNA[1