内容正文:
实验一:检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
(1)还原糖的鉴定:
1、常用材料:苹果和梨 观察现象明显
2、试剂: 斐林试剂(甲液: 0.1g/ml的NaOH 、乙液: 0.05g/ml的CuSO4 )
3、注意事项:①还原糖有葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖(单、二除蔗)
②甲乙液必须等量混合均匀后再加入样液中(现配现用)。
③必须用水浴加热(50~65℃)
4、颜色变化:浅蓝色Cu(OH)2 棕色 砖红色沉淀Cu2O
(2)脂肪的鉴定:
1、常用材料:花生子叶或向日葵种子
2、试剂: 苏丹Ⅲ染液 或 苏丹Ⅳ染液
3、注意事项:
①切片要薄且均匀,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰,有的地方模糊。
②染色时间不易过长,体积分数50%酒精的作用是洗去浮色 。
③需使用显微镜观察(是否使用显微镜,要看实验材料,如将材料制成匀浆则不用)
④使用不同的染色剂染色时间不同。
4、颜色变化: 橘黄色 或 红色
(3)蛋白质的鉴定:
1、常用材料:鸡蛋清、黄豆组织样液、牛奶
2、试剂:双缩脲试剂( A液: 0.1g/ml的NaOH 、B液: 0.01g/ml的CuSO4 )
3、注意事项:
①先加A液1ml,再加B液3-4滴;
②鉴定前留出一部分组织样液以便对比;
③用蛋清时一定要稀释,若稀释不够,与双缩脲试剂反应时,会黏在试管内壁,使得反应不够彻底,且试管不易清洗;
④加入双缩脲试剂的顺序不能颠倒,先用A液造成碱性环境后再加入B液。
4、颜色变化: 紫色
注意:双缩脲试剂只是检验物质中是否存在肽键,存在肽键的不一定是蛋白质。
例1.下列关于生物组织中有机物鉴定实验的叙述,正确的是( )
A.氨基酸、淀粉的鉴定分别使用双缩脲试剂、碘液
B.鉴定还原糖和蛋白质都需要进行水浴加热
C.双缩脲试剂和斐林试剂的使用方法不同
D.可用西红柿榨汁作为检测还原糖的材料
【答案】C
【解析】
【分析】
生物组织中有机物的鉴定原理:糖类中的还原糖(如葡萄糖、果糖)能与斐林试剂发生作用,在水浴加热的条件下生成砖红色沉淀;脂肪可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色);淀粉遇碘变蓝色;蛋白质可与双缩脲试剂发生紫色反应。
【详解】
A、氨基酸分子中不含肽键,不能与双缩脲试剂发生紫色反应,因此不能用双缩脲试剂鉴定氨基酸,A错误;
B、用双缩脲试剂鉴定蛋白质时不需要水浴加热,B错误;
C、使用双缩脲试剂时,A液和B液依次滴加到待测样品中,而使用斐林试剂时,甲液和乙液要等量混合后再使用,且要现配现用,C正确;
D、红色的西红柿汁会对还原糖的鉴定实验产生颜色干扰,D错误。
故选C。
例2.某研究小组测定小麦种子成熟过程中相关物质干重的百分含量,结果如下图所示。请回答:
(1)在小麦种子成熟过程中,种子中淀粉含量的变化趋势是________________________。
(2)试分析,在6~20天内小麦种子中淀粉含量上升的原因是_______________________。
(3)在上述定量测定之前,研究小组进行了还原性糖含量变化的预测实验,请填充实验原理,完成实验步骤,并写出初步的实验结论。
实验原理:还原性糖__________________________________________,颜色深浅与还原性糖含量成正比。
(4)实验步骤:
①取三份等量的分别发育至6、12、18天的小麦种子,各加入适量蒸馏水,研碎、提取、定容后离心得到还原性糖制备液;
②取3支试管,编号A、B、C,分别加入等量的上述还原性糖制备液;
③在上述试管中分别加入_________________________________;
④___________________________________________________________________________________,观察颜色变化。
(5)预期结果:__________________________________________________________________。
【答案】先增加后保持稳定 还原糖不断转化成淀粉 与斐林试剂在水浴加热条件下产生砖红色沉淀 等量且适量的(或1ml)斐林试剂 将三只试管放入盛有50~65℃温水的大烧杯中加热约2分钟 A试管中砖红色沉淀颜色最深,其次是B试管,C试管中砖红色沉淀颜色最浅
【解析】
【分析】
斐林试剂可用于鉴定还原糖,在水浴加热的条件下,溶液的颜色变化为砖红色(沉淀)。斐林试剂只能检验生物组织中还原糖(如葡萄糖、麦芽糖、果糖)存在与否,而不能鉴定非还原性糖(如淀粉、蔗糖)。
题图分析,小麦种子成熟过程中,还原性糖的含量逐渐降低