浙科版选修一高中生物1.1：大肠杆菌的培养与分离(共25张PPT)

第一部分 :微生物的利用 微生物：结构简单,形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物。通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到单个生物体，90%以上的微生物是对人类有益的。 实验1 大肠杆菌的培养与分离 第一部分 :微生物的利用 大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，几占粪便干重的1/3。常随粪便散布在周围环境中。正常栖居条件下不致病。一些特殊基因型的大肠杆菌对人和动物有致病性。繁殖迅速，培养容易，是生物学上重要的实验材料 。 繁殖迅速，培养容易，它是生物学上重要的实验材料 实验目的: 1.进行大肠杆菌的扩大培养 2.进行大肠杆菌的分离 (一)实验设备及用具 1. 250mL三角瓶、封口膜和橡皮圈 2. 培养皿 3. 接种环 4. 酒精灯 5. 有棉塞的试管 6.恒温培养箱 、超净台、摇床、灭菌锅 无菌操作的一般流程 实验前 仪器、培养基高压蒸汽灭菌 ↓ 实验中 防止 杂菌污染 ↓ 实验后 操作仪器 灭菌 防止菌外泄 ☆ 培养基 是由人工方法配制而成的，专供微生物或动植物细胞生长繁殖使用的混合营养液。另外还需要满足微生物生长对pH 、氧气、二氧化碳及渗透压的要求。 (二)培养基的配制 ☆ LB液体培养基（细菌通用培养基） 50mL 蛋白胨0.5g,酵母提取物0.25g,氯化钠0.5g,水50mL ☆ LB固体平面培养基 1g琼脂 1．计算、称量 2．溶化 3．调pH：　pH7．6　 4．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在试管管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角的量以不超过三角容积的一半为宜。 5．加封口膜 6.灭菌 LB液体和固体培养基用高压锅高压蒸汽灭菌（121℃1kg/㎝压力灭菌15分钟） 培养基配制步骤 封口膜：既通气又不使菌进入 （三）大肠杆菌的扩大培养和分离的技术 1.灭菌 2.倒平板 3.接种并扩大培养 4.划线分离 5.保存 LB液体和固体培养基及培养皿用高压锅高压蒸汽灭菌（121℃1kg/㎝2压力灭菌15分钟） 将LB固体培养基倒入灭菌后的培养皿中，制备平面培养基 在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠