内容正文:
第二章 第一节
什么是克隆
克隆技术
1.含义:用于分子、细胞水平的描述,指从众多的基因或细胞群体中通过无性繁殖和选择获得____________或特定类型细胞的技术操作。当用于个体水平的描述时,克隆就是一种通过___________,特别是来自___________的单个体细胞进行无性繁殖,从而产生新个体的过程或技术。
目的基因
单个细胞
特定个体
2.发展:_______克隆→细胞克隆→个体克隆。
3.条件:
(1)具有包含________________________的活细胞。
(2)能有效调控细胞核发育的细胞质物质。
(3)完成___________的必要的环境条件。
分子
物种完整基因组的细胞核
胚胎发育
基因克隆
分、切、接、转、筛
分:目的基因的获得
1、PCR(RT-PCR)
2、酶切
切:限制性核酸内切酶酶切目的基因和载体。
接:目的片段与载体的连接
转:连接产物转入宿主细胞。
筛:筛选含有正确序列重组质粒的细菌。
微生物克隆(细胞水平)
遗传工程克隆
(分子水平)
多利
世界上首例克隆马“普罗梅泰亚”在意大利出生。后面是它的“母亲兼姐姐”。
克隆技术的发展
巴西首次培育成功克隆牛。
第一只克隆猫cc诞生
四、生物的克隆需要满足的条件
(以克隆羊多莉为例)
1、具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞。
2、能有效调控细胞和核发育的细胞质物质。
3、完成胚胎发育的必要的环境条件。
思考感悟
2.克隆的理论条件是什么?
【提示】 细胞具有发育全能性。
1.分子水平上的基因克隆
(1)含义:是对某种目的基因的复制、分离过程。
(2)方法:
要点
克隆在不同水平上的含义
2.细胞水平上的细胞克隆:杂交瘤细胞的培养
(1)含义:骨髓瘤细胞与B淋巴细胞的融合产物。
(2)制备过程:用已免疫的效应B细胞和骨髓瘤细胞杂交获得三种融合细胞:B细胞与B细胞、B细胞与瘤细胞、瘤细胞与瘤细胞的融合(当然还有不能融合的B细胞和瘤细胞),然后用选择培养基筛选获得杂交瘤细胞。
3.个体克隆
(1)含义:由母体的特定部位或结构产生新个体。
植物克隆:如马铃薯块茎、草莓的匍匐茎、玫瑰的插枝等。
动物克隆:如变形虫的分裂、水螅出芽、蚯蚓的断裂等。
(2)原因:细胞核具有基因组全套遗传信息,有发育成完整个体的潜能。
有关克隆技