1.2 基因工程的基本操作程序-人教版高中生物选修三课件(共68张PPT)

基因工程基本操作的四个步骤 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 获取的主要方法？ 构建的主机要目的？组成？ 导入植物细胞、动物细胞、 微生物细胞的方法分别是？ 怎样判断目的基因是否成功导入受体细胞？ 怎样判断导入后是否能够成功表达？ 一、获取目的基因 目的基因的定义 主要指的是编码蛋白质的基因，比方说，和优良品质相关的基因，和生物药物和保健品相关的基因，以及和工业所需酶相关的基因，也可以是一些具有调控作用的因子。 　 目前被广泛的提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、植物抗病基因（抗病毒、抗细菌)、人胰岛素基因等。 供体生物细胞 取出DNA 用限制酶剪去多余部分 目的基因 从基因文库中寻找 多聚酶链式反应（PCR）扩增 化学合成法 目的基因的核苷酸序列未知 目的基因的核苷酸序列已知 （一）获取目的基因的常用方法有哪些? 初始目的基因的来源 1. 从生物中直接获取 2. 人工合成 注意：要保持基因的完整性 * 方法一：从基因文库中获取目的基因 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。 基因文库 基因文库 基因组文库 部分基因文库 （如:cDNA文库） 基因组文库: 将某种生物体内的DNA全部提取出来，选用适当的限制酶，将DNA切成一定范围大小的DNA片段，然后，将这些DNA片段分别与载体连接起来，导入受体菌的群体中储存，每个受体菌都含有了一段不同的DNA片段，也就是说，这个群体包含了这种生物的所有基因，叫做这种生物的基因组文库。 cDNA文库 (部分基因文库) 如果用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA（也叫cDNA)片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，那么，这个受体菌群就叫做这种生物的cDNA文库。 基因组DNA文库 基因组DNA文库 cDNA文库 鸟枪法 人工合成 以原核生物为主 真核生物 cDNA合成过程 专一性强，目的基因中不含不表达部分 原核细胞的基因结构 原核细胞基因 编码区（编码序列）：能指导有关蛋白质的合成，即能够编码蛋白质 非编码区（调控序列）：位于编码区上游和编码区下游的DNA序列，虽不能指导有关蛋白质的合成，但有调控