专题11 现代生物科技专题-2020年高考生物三轮复习核心考点查漏补缺

考点29　基因工程、蛋白质工程和细胞工程 1．基因工程常考的3种基本工具 (1)限制性核酸内切酶：识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。 (2)DNA连接酶：①E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端；②T4 DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。 (3)载体：①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制。②有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段(基因)插入其中。③具有特殊的标记基因——以便对含目的基因的受体细胞进行鉴定和选择。 2．基因工程的4大操作程序 (1)目的基因的获取：①从基因文库中获取。 ②利用PCR技术扩增：a.原理：DNA双链复制。b.条件：模板DNA、引物、游离的脱氧核苷酸、热稳定的DNA聚合酶。 ③用化学方法直接人工合成。 (2)基因表达载体的构建 ①基因表达载体模式图 ②基因表达载体的构建过程 (3)将目的基因导入受体细胞 ①导入植物细胞：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。 ②导入动物细胞：显微注射技术。 ③导入微生物细胞：感受态细胞法(用Ca2＋处理)。 (4)目的基因的检测与鉴定 ①插入检测：DNA分子杂交技术。 ②转录检测：DNA—RNA分子杂交技术。 ③翻译检测：抗原—抗体杂交。 ④个体水平检测：抗性接种实验。 3．图解记忆蛋白质工程 4．比较记忆植物组织培养与动物细胞培养 项目 植物组织培养 动物细胞培养 取材 植物幼嫩部位 动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 过程 结果 获得植株个体，可以体现全能性 新的细胞，不形成个体，不体现全能性 条件 ①无菌；②营养；③适宜条件 ①无菌、无毒；②营养、血清等；③温度和pH；④气体环境：O2、CO2 5.植物体细胞杂交与单克隆抗体制备过程比较 步骤 植物体细胞杂交过程 单克隆抗体制备过程 第一步 原生质体的制备(酶解法) 正常小鼠免疫处理 第二步 原生质体融合(物理、化学法) 动物细胞融合(物理、化学、生物方法) 第三步 杂种植株的筛选与培养 杂交瘤细胞的筛选与培养 第四步 杂种植株的诱导与鉴定 单克隆抗体的提纯 相同点 ①两种技术手段的培养过程中都进行有丝分裂，都是无性繁殖，都可称为克隆，都不涉及减数分裂；②均为无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件 (1)诱导融合的方法分别有哪些？融合的