内容正文:
最基础的是
——动物细胞培养技术
动物细胞工程常用的技术:
动物细胞培养
动物细胞核移植
动物细胞融合
单克隆抗体 等
2.2动物细胞工程
2.2.1 动物细胞培养和
核移植技术
如果一个大面积烧伤的病人,自体皮肤有限,其他渠道的皮肤来源不足同时会发生免疫排斥。如何才能获得大量的自体健康皮肤?
一、动物细胞培养
1、概念:从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
怎样进行动物细胞培养?
1)相关组织一般取自动物胚胎或幼龄动物的组织或器官,因为这些细胞分化程度低,代谢活动旺盛,增殖能力很强(端粒有关),更易于培养。
2)分散成单个细胞的原因,因为成块的组织中,细胞与细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖,因此需要分散为单个细胞。这样有利于①保证了细胞所需营养的及时供应,②保证了细胞内有害代谢产物的及时排出。
3)动物细胞培养的原理是细胞增殖。
2、
动物细胞培养的过程
细胞悬浮液
↓
↓
↓
↓
4)细胞贴壁 5) 接触抑制
1)胰蛋白酶的作用是怎样的呢?由此可以说明细胞间的物质是什么成份?
2)能用胃蛋白酶吗?
3)酶作用会破坏细胞吗?
P44思考
动物胚胎、
幼龄动物组织
和器官
剪碎组织
胰蛋白酶或胶原蛋白酶
处理,形成单个细胞
贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶
处理,分散成单个细胞
原代培养
传代培养
P44思考
1)用胰蛋白酶来分散细胞,由此可说明细胞间的物质主要是什么成分?
2)能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么?
3)胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?那将动物组织分散成单个细胞时要注意什么问题呢?
主要是蛋白质(胶原蛋白等)。
细胞膜的主要成分是蛋白质和磷脂,胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质外,长时间的作用,也会消化细胞膜上的蛋白质,对细胞有损伤,因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
不能,因为动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。
2、
动物细胞培养的过程
细胞悬浮液
↓
↓
↓
↓
4)细胞贴壁 5) 接触抑制
1)胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质是什么成份?
2)能用胃蛋白酶吗?
3)酶作用会破坏细胞吗?
动物胚胎、
幼