专题04 生物技术实践-【口袋书】2020年高考生物必背知识手册（浙科版）

专题四 选修一生物技术实践必背知识 实验一 大肠杆菌的培养和分离 【考点一】培养基 1、培养基配置 ①微生物的生命活动需要五大营养要素：水、无机盐、碳源、氮源、生长因子； ②有的物质既是碳源又是氮源（为微生物生长提供碳元素和氮元素），如：蛋白质、蛋白胨； ③有的既是碳源又是生长因子（是微生物生长不可缺少的微量有机物），如：酵母提取物； ④“细菌喜荤，霉菌喜素”；细菌喜37℃的温度；霉菌喜25-30℃的温度； ⑤细菌的培养基：蛋白胨、酵母提取物、一定量的氯化钠，以维持一定的渗透压；通常在中性偏碱的环境中生长； ⑥霉菌的培养基：一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可；通常在中性偏酸的环境中生长； ⑦在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要适宜的pH、温度以及特殊营养物质，以满足微生物生长对的要求。 2、培养基的种类及用途： ①液体培养基：呈现液态，用于扩大培养和工业生产； ②固体培养基：配制时需加入琼脂（凝固剂），呈固态，用于菌种分离、鉴定、计数等； ③我们一般用LB液体培养基来扩大培养大肠杆菌，用LB固体培养基来分离大肠杆菌。 【考点二】灭菌和消毒 1、无菌技术：人们利用微生物完成一定的反应，必须要求某种微生物是没有被其他微生物污染的，因此，在培养微生物时必须进行无菌操作； 2、灭菌是用物理或化学的方法，杀死或除去环境中的一切微生物的方法。杀死病原菌的方法叫消毒。如：实验室要对使用前和使用后的培养基、各种容器进行灭菌；要对实验服、对病人的排泄物和衣物进行消毒。 3、干热灭菌法：是利用火焰将接种环和试管上的微生物烧死（又称灼烧灭菌法），或在140-160℃的烘箱中加热2-3h，将微生物的营养体和芽孢杀死。 4、加压蒸气灭菌法（高压蒸气灭菌法）：这是生产和实验室常用的灭菌法，将灭菌锅内通入压力达到1000g/cm2的高压蒸气，锅内温度达121℃，持续15-30min，即可达到灭菌目的； 注意：当培养基内有葡萄糖时，为防止葡萄糖分解碳化，要用500g/cm2压力（90℃以上）灭菌30min。 5、过滤灭菌法：有些化合物（尿素、碳酸氢钠等）加热会分解，如培养基中需要时，只能配成溶液单独过滤灭菌；通常用G6玻璃砂漏斗过滤。其他型号（如：G1-G5）的不能除菌。（注意：玻璃砂漏斗使用方法：使用前也要用高压蒸汽灭菌，玻璃砂漏斗有6种型号，即G1-G6，G6孔径最小，细菌