苏教版高中生物选修3-1.1.2 基因工程的工具——酶与载体-课件(共133张PPT)

基因工程的工具——酶与载体 基因工程过程示意图 ①从细胞中分离出DNA ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ②限制酶截取DNA片断 ③分离大肠杆菌中的质粒 ④ DNA重组 ⑤用重组质粒转化大肠杆菌 ⑥培养大肠杆菌克隆大量基因 药物基因: 人的胰岛素基因 胰岛素 基因工程工具酶 基因工程的操作，是在分子水平上的操作，是依赖一些酶(如限制性核酸内切酶，连接酶，DNA聚合酶等)作为工具对基因进行人工切割，拼接和扩增等操作。所以把这些酶称之为“工具酶”。工具酶对野生菌株（或真核生物如酵母）进行改造、优化、而产生的生物工程产品。 随着越来越多的酶分子被发现，许多厂商已将其克隆并开发成产品，工具酶的数量和用途不断增加，不仅简化了分子克隆的操作，而且拓宽了研究领域。 基因组DNA 目的基因 目的基因 基因载体 重组体(复制子) 基因重组 核 酸 核酸水解酶类 核酸合成酶类 核酸修饰酶类 核酸内切酶核酸外切酶 DNA聚合酶RNA聚合酶DNA连接酶 甲基化酶 核苷酸激酶 核苷酸转移酶 磷酸酶 一. 酶限制性核酸内切酶 * G C A A T G C T T A G C C A T C G T T A C G A A T C G G T A 核酸外切酶 核酸内切酶 核酸外切酶 5’ 5’ G C A A G C T T T A G C C A T C G T T C G A A A T C G G T A 限制性核酸内切酶 5’ 5’ 限制性核酸内切酶 能在特异位点（酶切位点）上催化双链DNA分子的断裂,产生相应的限制性DNA片段。 存在于细菌体内。 切割不同来源的DNA分子将产生特征性限制性酶切图谱，具有重大应用价值（“分子手术刀”）。 AGCT AGCT AGCT AGCT AGCT NNNNN NNNNNNNNNNNNNNN NNNNNNN NNNNNNNN NNNNNNNNN NNNN NNN Alu Ⅰ （+） （-） 电泳 E coli K株 噬菌体 E coli K株 其他 E coli 菌株 限制现象 细胞的限制—修饰作用 细菌的限制—修饰系统 ①1962年W.Arber(瑞士)发