江苏省灌云县四队中学苏教版高中生物选修三自主学习任务单：基因工程 第 2 课时获取目的基因、构建基因表达载体（答案不全）

基因工程 自主学习任务单 第 2 课时 获取目的基因、构建基因表达载体 【学习目标】 1. 概述获取目的基因的方法,特别说明 PCR 的原理。 2. 说出基因表达载体的问建。 学习任务一获取目的基因 【基础梳理】自主阅读书本 1.通过基因文库获取目的基因 (I)概念？ (2)种类 基因组文库:包含某种生物 的基因文库 部分基因文库:包含某种生物 的基因文库 2.通过 PCR 技术扩增目的基因 (1) 原理: (2) 基本过程 ①加入反应物质:在离心管中加人所需要的模板 DNA、 、4 种 以及 酶。 ②变性:加热至 ℃，使 DNA 中的 键 断裂，双链解开。 ③退火(复性):冷却到 55 C，引物与单链 DNA 相应互补序列结合。 ④延伸:加热至 72 C 左右，在 酶的作用下,沿模板延伸子链，最终 合成 2 条 DNA 分子。 (3)若 PCR 过程中，扩增循环的次数是 n,则目的基因的量将被扩增 倍。 (4)PCR 技术中因为需要在高温下进行，因此 TaqDNA 聚合酶需要具有 性。 3.通过化学方法直接人工合成目的基因 如果目的基因较小， 又已知，可以通过 DNA 合成仪用化学方法直 接人工合成。 【深化探究】 1.从基因文库中获取目的基因 (1)cDNA 文库是从某种生物的某一细胞中提取出 mRNA,经道转录过程获得的基 因文库，为什么该基因文库仅含有该生物的部分基因? (2)结合概念，从范围上比较基因组文库和 cDNA 文库(部分基因文库)之间的大小 关系: ( 6 ) 2.PCR 技术与细胞内 DNA 复制的比较 学习任务二 构建基因表达载体 【基础梳理】自主阅读书本 基因表达载体的构建(如图) 1. 启动子:位于 的一段核苷酸序列，是 识别、结合的部位， 能驱动基因 。 2.终止子:是一段特殊的 DNA 片段，是载体上终止的基因转录的核苷酸序列。 3.标记基因:是为了鉴别受体细胞中是否含有 。常用的标记基因主要 是 、某些生化表型基因 。 4.目的基因:目的基因插在 和 之间。 【深化探究】 结合基因表达载体模式图分析以下问题 1.启动子和终止子与起始密码子和终止密码子是一回事吗？ 2.为什么目的基因要插入启动子和终止子之间？ 3.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图 1、图 2 中箭头表示相关 限制酶