内容正文:
第四章第3课时 DNA的粗提取和鉴定
记录与整理
教学目标
1.了解DNA的物理化学性质,理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。
2.尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取及鉴定。
3.培养实事求是的科学态度和探索精神。
教学重点
DNA粗提取及DNA鉴定的原理
教学难点
DNA粗提取及DNA鉴定的过程
【导学引领】结合教材P64认真阅读本张教学案,思考以下问题:
1.DNA粗提取的选材,思路和鉴定原理是什么?
2.DNA与蛋白质的性质差异如何?
3.破碎动物细胞和植物细胞的方法有何不同?
4.根据DNA在NaCl溶液中的溶解度不同如何控制其溶解和析出?
5.DNA粗提取和鉴定的步骤是什么?
一、实验目的
初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。
二、实验原理
(1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度 。当氯化钠的物质的量浓度为 时,DNA的溶解度最低。
(2)DNA不溶于 ,但是细胞中的某些物质则溶于 ,利用这一原理可以进一步提取含杂质较少的DNA。
(3)DNA+二苯胺 。
三、实验材料用具
鸡血细胞液5~10ml(本实验还可以用菜花做实验材料)。
铁架台,铁环,镊子,三脚架,酒精灯,石棉网,载玻片,玻璃棒,滤纸,滴管,量筒(100ml,1个),烧杯(100ml、500ml,各1个;50ml、1000ml,各2个),试管(20ml,2支),漏斗,试管夹,纱布。体积分数为95%的酒精溶液(实验前置于冰箱内冷却24h),蒸馏水,质量浓度为0.1g/ml柠檬酸钠溶液,物质的量浓度为2mol/L和0.015mol/L的氯化钠溶液,二苯胺试剂。
四、DNA粗提取的实验步骤
1制备鸡血细胞液
(也可以将血液倒入离心管内,用1000r/min(转每分)的离心机离心2min,此时血细胞沉淀于离心管底部。实验时,用吸管除去离心管上部的澄清液,就可以得到鸡血细胞液。)
(2)提取鸡血细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液5~10ml,注入到50ml烧杯中。向烧杯中加入 20ml,同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌5min,使血细胞加速破裂。然后,用放有纱布的漏斗将血细胞液过滤至1000ml的烧杯中,取其 。
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