内容正文:
中物理
专题1 第1节(建议2课时)
人教版 生物(高中)
DNA分子重组技术的基本工具
轻松备课
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课堂导入:如何培育出这样的作物品种?
2.引入
一、DNA重组技术的基本工具
三种基本工具
剪刀
针线
运输车
限制性核酸内切酶
DNA连接酶
运载体
来源
种类
作用
作用
结果
阅读课本4-5页“限制性核酸内切酶——分子手术刀”的相关内容,填写下表:
自主学习一
主要从原核生物中分离纯化而来
已经分离出大约4000种
1、识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列
2、使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
形成两种末端:黏性末端或平末端
体现了酶的--------
专一性
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仔细观察各限制酶 识别的特定序列有何特点?
限制酶的识别序列
中轴线
在G与A之间切割
大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)只能识别GAATTC
序列,并在G和A之间切开。
酶一:EcoRI限制酶
黏性末端
黏性末端
酶一:EcoRI限制酶
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SmaI只能识别CCCGGG序列,并在C和G之间切开
中轴线
酶二:SmaI限制酶
在G与C之间切割
平末端 平末端
酶二:SmaI限制酶
1.你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗?
寻根问底
2.为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA?
破坏外源DNA,保护自我
缺乏特定的核苷酸序列
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类型
来源
功能
相同点
差别
E·coliDNA连接酶
T4DNA连接酶
大肠杆菌
T4噬菌体
恢复磷
酸二酯
键
只能连接黏性末端
能连接黏性末端和
平末端(效率较低)
阅读课本第5页“分子缝合针”——DNA连接酶的相关内容,填写下表
自主学习二
DNA连接酶的缝合作用—粘性末端
注意:DNA连接酶可连接双链DNA中的DNA单链缺口,但不能连接单链DNA!
DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?
T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来,但效率较低
DNA连接酶的缝合作用—平末端
DNA连接酶 DNA聚合酶
相同点 作用实质
化学本质
不
同
点 模板
作用对象
作用结果
用途
都能催化形成磷酸二酯键
都是蛋白质
不需要
需要
形成完整的重组DNA分子
形成DNA的一条链
基因工程
DNA复制
DNA连接酶与DNA聚合酶的比较
只能将单个核苷酸连