内容正文:
专题七 现代生物科技专题(选修3)
第1讲 基因工程和细胞工程
1.基因工程的相关判断
(1)携带链霉素抗性基因受体菌的筛选必须通过分子检测( )
(2)转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过分子检测( )
(3)一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列( )
(4)用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸( )
(5)每个重组质粒至少含有一个限制性核酸内切酶识别位点( )
(6)自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上,属于基因工程( )
(7)转抗虫基因的植物,不会导致昆虫群体抗性基因频率增加( )
(8)重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子中脱氧核糖和磷酸交替连接( )
(9)应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达( )
(10)动物的生长激素基因转入植物后不能表达( )
2.细胞工程的相关判断
(1)产生抗人白细胞介素8抗体的杂交瘤细胞的筛选必须通过分子检测( )
(2)21三体综合征的诊断必须通过分子检测( )
(3)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是组织培养( )
(4)去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理( )
(5)乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养( )
(6)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞( )
(7)动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体体现了细胞的全能性( )
(8)体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体( )
(9)单克隆抗体技术可用于治疗老年痴呆症( )
(10)细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行( )
整合考点 基因工程和细胞工程
1.理清基因工程3种操作工具的作用与特点
限制酶
DNA连接酶
载体
作用
切割目的基因和载体
拼接DNA片段形成重组DNA分子
携带目的基因进入受体细胞
作用部位
两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键
作用特点(条件)
①识别特定的核苷酸序列;
②在特定位点上切割DNA分子
①E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端;②T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端
①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制;
②有一个至多个限制酶切割位点;
③具有特殊的标记基因
2.掌握基因工程的操作步骤
(1)目的基因的获取途径
方法
具体操作
直接分离
从自然界已有的物种中分离,如从________ 中获取
人工
合成
化学合成
已知核苷酸序列的________ ,直接利用DNA合成仪用化学方法合成,不需要模板
反转录法
以RNA为模板,在________ 作用下人工合成
PCR技术扩增
目的基因DNA受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,然后在________ 作用下延伸
(2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建[来源:学,科,网]
①表达载体的组成:目的基因+________+________+标记基因+复制原点。
②启动子和终止子:启动子是________结合位点,启动转录;终止子是________的位点。
③基因表达载体的构建过程:
(3)将目的基因导入受体细胞
植物细胞
动物细胞
微生物细胞
常用方法
__________法、基因枪法、__________法
_______技术
__________法(用Ca2+处理)
受体细胞
受精卵、体细胞
________
原核细胞
(4)目的基因的检测与鉴定
类型
步骤
检测内容
方法
结果显示
分子
检测
第一步[来源:学科网ZXXK]
目的基因是否进入受体细胞
DNA分子杂交(DNA和DNA之间)
是否成功显示出杂交带
第二步
目的基因是否转录出mRNA
分子杂交技术(DNA和mRNA之间)
是否成功显示出杂交带
第三步
目的基因是否翻译出蛋白质
抗原—抗体杂交
是否成功显示出杂交带
个体
水平
鉴定
做抗虫或抗病的接种实验,以确定是否有抗性以及抗性的程度;基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较,以确定功能是否相同
3.图解记忆蛋白质工程(填图)
4.理清植物细胞工程两大技术
5.比较并把握细胞工程的几个流程图
细胞工程技术
技术过程图示
植物组织培养
动物细胞培养
→10~50代细胞细胞系
|←原代培养→|←传代培养→|
植物体细胞杂交
动物细胞的融合
单克隆抗体的制备
核移植
6.动物细胞培养的特殊条件归纳
(1)胰蛋白酶的使用:首先用胰蛋白酶处理动物的器官或组织,以制备单细胞悬液;培养过程中发生接触抑制时,同样需要用胰蛋白酶使细胞分散开。
(2)避免杂菌污染的措施