内容正文:
基因工程专题复习
一、基因工程的基本操作工具
基因工程,通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。
基因工程的概念
DNA重组技术或基因拼接技术
生物体外
基因重组
人类需要的生物类型和生物产品
定向改造性状、打破物种界限
剪切→拼接→导入→检测表达
基因工程的别名
操作环境
原理
基本过程
优势
目的
DNA重组技术的基本工具
“分子手术刀”--
“分子缝合针”--
“分子运输车”--
限制性核酸内切酶
DNA连接酶
载体
DNA重组技术的基本工具
识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶 化学本质:蛋白质。
1、来源:
3、作用:
4、结果:
形成两种末端
可用于目的基因和载体的切割
2、特性:
限制酶是一类酶,而不是一种酶。
一、 限制酶——“分子手术刀”
黏性末端
平末端
磷酸二酯键
A
T
1
2
3
4
5
1
2
3
4
5
黏性末端
黏性末端
EcoRI限制酶的切割
被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。
平末端 平末端
SmaI限制酶的切割
当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。
例1.下列有关基因工程中限制性内切酶的描述,错误的是 ( )
A.一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B.限制性内切酶的活性受温度影响
C.限制性内切酶能识别和切割RNA
D.限制性内切酶可从原核生物中提取
C
1、种类:
2、作用部位:
磷酸二酯键
二、 DNA连接酶——“分子缝合针”
(黏性末端)
(黏性末端和平末端)
E·coli DNA连接酶
T4 DNA连接酶
两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来
DNA连接酶的缝合作用
可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,
DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?
A A T T G
C
DNA聚合酶的作用
A
A
T
T
A
A
T
T
DNA聚合酶
DNA聚合酶