内容正文:
第9讲 光合作用
第三单元 细胞的能量供应和利用
[考纲要求]
1.光合作用的基本过程(Ⅱ)
2.影响光合作用速率的环境因素(Ⅱ)
3.实验:叶绿体色素的提取和分离
一、实验 绿叶中色素的提取和分离
1.实验原理
(1)提取:绿叶中的色素溶于有机溶剂无水乙醇而不溶于水,可用无水乙醇提取色素。
(2)分离:各种色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快,反之则慢,从而使各种色素相互分离。
(3)方法:纸层析法
2.实验步骤
提取色素:称取5 g绿叶,剪碎,放入研钵中,加入少量二氧化硅、碳酸钙和10 mL无水乙醇→研磨→过滤→收集到试管内并塞严试管口
制备滤纸条:将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条,将滤纸条一端剪去两角,在距离剪角一端1 cm处用铅笔画一条细的横线
画滤液细线:用毛细吸管吸取少量的滤液,沿铅笔线均匀地画一条细线,待滤液干后,再画1~2次
分离色素:将适量的层析液倒入试管中,插入滤纸条,随后软木塞塞紧试管口。分离过程如图所示
观察结果:滤纸条上呈现四条颜色、宽度不同的色素带,如图所示
色素带条数与色素种类有关,色素带宽窄与色素含量有关,色素扩散速度与溶解度有关。若将长形滤纸条换成圆形滤纸观察层析实验结果,将出现四个同心圆,从外向内顺序与纸条从上到下顺序相同。
溶解度 扩散速度
最高 最快
较高 较快
较低 较慢
最低 最慢
3、实验中的注意事项及操作目的
过程 注意事项 操作目的
提
取
色
素 (1) 选新鲜绿色的叶片 使滤液中色素含量高
(2) 研磨时加无水乙醇 溶解色素
(3) 加少量SiO2和CaCO3 研磨充分和保护色素
(4) 迅速、充分研磨 防止乙醇挥发,充分溶解色素
(5) 盛放滤液的试管管口加棉塞 防止乙醇挥发和色素氧化
分
离
色
素 (1) 滤纸预先干燥处理 使层析液在滤纸上快速扩散
(2) 剪去两角 使层析液同步到达滤液细线
(3) 滤液细线要直、细、齐 使分离出的色素带平整不重叠
(4) 滤液细线干燥后再画一两次 使分离出的色素带清晰分明
(5) 滤液细线不触及层析液 防止色素直接溶解到层析液中
4.绿叶中色素提取分离实验异常现象分析
(1)收集到的滤液绿色过浅的原因分析
①未加石英砂(二氧化硅),研磨不充分。
②使用放置数天的叶片,滤液色素(叶绿素)