19-20中图生物选修1（课件+教师用书）第6章 章末复习提升课(六) (2份打包)

章末复习提升课(六) 聚丙烯酰胺凝胶的优点 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持物的电泳方法，其优点如下： 1．聚丙烯酰胺没有或很少带有离子的侧基，因而其凝胶电泳作用比较小，不易和样品相互作用。 2．可以根据需分离物质的分子大小，选择合适的凝胶成分，使之既有适宜的空隙度，又有比较好的机械性能。 3．在一定浓度范围内聚丙烯酰胺对热稳定。凝胶无色透明，易观察，可用检测仪直接测定。 PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的引物。PCR由高温变性—低温复性—中温延伸三个基本反应步骤构成： 1．高温变性：模板DNA经加热至95 ℃左右，一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解旋，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮循环作准备。 2．低温复性：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55 ℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。 3．中温延伸：DNA模板—引物结合物在耐高温的DNA聚合酶的作用下，以四种脱氧核苷酸为原料，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的“半保留复制链”，重复循环高温变性—低温复性—中温延伸三个过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又成为下次循环的模板。 1/2 $$