内容正文:
第一节 动物细胞培养
一、学习目标
1.简述动物细胞培养的过程。
2.描述动物细胞培养的过程。
二、重难点分析
动物细胞培养的过程。
三、学习过程
(一)预习导学
1.细胞培养的基本条件
(1)无毒、_______的环境。
(2)基本的营养物质和生长因子:如葡萄糖、_______、无机盐、维生素、_______等。
(3)人体细胞培养的标准温度:(36.5±0.5)℃;大多数细胞的适宜pH:7.2~7.4。
(4)气体环境:95%_______,5%_______。
答案:
无菌 氨基酸 核苷酸 氧气 二氧化碳
2.细胞培养的过程
(1)基本过程:健康动物的组织
↓剪碎,用___________处理
单个细胞(分离细胞)
↓加培养液
制成细胞悬浮液
培养↓___________培养
细胞株
___________培养↓遗传物质改变
细胞系
①原代培养:将组织从健康动物体内取出,用浓度与活性适中的___________处理成单个细胞,然后用培养基配成一定浓度的细胞悬浮液,___________培养的过程。
②传代培养:把___________培养的细胞定期用胰蛋白酶将它们从瓶壁上脱离下来,重新分散成细胞悬浮液,分装到多个培养瓶中继续培养的过程。
③细胞株:传代培养的细胞能传到___________代,这种传代细胞叫做细胞株。
④细胞系:细胞株传至50代后有部分细胞的___________发生了改变,并且有癌变的特点,有可能在培养条件下无限地传下去,这种传代细胞叫做细胞系。
(2)特点:___________生长,___________抑制。
(3)冻存及复苏。
①冻存:长期保存细胞一般采用超低温冻存法。将细胞和保护剂放入-196℃的液氮中进行保存。
②复苏:将冻存的细胞放在37℃温水中解冻,细胞逐渐“苏醒”,再经过培养,细胞就能继续生长。
答案:
胰蛋白酶 传代 传代 胰蛋白酶 转入培养瓶 原代 10~50 遗传物质 贴壁 接触
3.细胞培养的意义
(1)生产酶、生长因子、疫苗、单克隆抗体等生物制品。
(2)为皮肤大面积烧伤或烫伤病人培养出___________,供受伤者移植使用。
(3)进行____