内容正文:
基因工程
生物体外
基因
DNA分子水平
剪切
拼接
导入
表达
人类需要的基因产物
一、基因工程 DNA重组技术
实质:基因重组
操作环境
操作对象
操作水平
基本过程
结 果
二、基因操作的工具
1、基因的剪刀——限制酶
2、基因的针线——DNA连接酶
3、基因的运输工具——运载体
2、基因的的针线——DNA连接酶
连接的部位: 磷酸二酯键(在“梯子”的扶手处), 不是氢键(在“梯子”的踏板处)。
结果:两个相同的黏性末端的连接。
思考
(1)用DNA连接酶连接两个相同的黏性末端要连接几个磷酸二酯键?
(2)用限制酶切一个特定基因要切断几个磷酸二酯键?
2个
4个
3、基因的运输工具——运载体
作用:
具备的条件
种类:
将外源基因送入受体细胞。
能在宿主细胞内复制并稳定地保存
具有多个限制酶切点
具有某些标记基因
质粒、噬菌体的衍生物和动植物病毒。
使用运载体的目的:
用它作为运载工具,将目的基因送到宿主细胞中去。
质粒上会存在某些标记基因,标记基因有什么用途?(鉴别受体细胞是否含有目的基因并筛选含目的基因的受体细胞)
思考
三、基因操作的基本步骤
1、目的基因的获取
2、基因表达载体的构建
3、将目的基因导入受体细胞
4、目的基因的检测和鉴定
1、目的基因的获取
(一)、目的基因主要是______________________
编码蛋白质的结构基因
(二)、获取目的基因的常用方法有哪些?
(1)从基因文库中获取
(2)利用PCR技术扩增
(3)人工合成
(1)、从基因文库中获取目的基因
将含有某种生物不同基因的许多DNA片断,导入到受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库.
基因文库:
基因文库
基因组文库
部分基因文库
(如:cDNA文库)
① 概念:PCR全称为_______________,是一项
在生物____复制___________的核酸合成技术
③条件:___________、_______________、___________ 、 ___________ .
②原理:__________
多聚酶链式反应
体外
特定DNA片段
DNA双链复制
模板DNA
四种脱氧核苷酸
DNA引物
热稳定DNA聚合酶
利用PCR扩增目的