浙科版高中生物选修3第1章第2节基因工程的原理和技术 (共33张PPT)

第二节 基因工程的原理和技术 基因工程的基本操作程序 1、获得目的基因 2、形成重组DNA分子 3、将重组DNA分子导入受体细胞 4、筛选含有目的基因的受体细胞 5、目的基因的表达 一、获得目的基因 目的基因：让人们感兴趣的基因，如抗病基因，人胰岛素基因等。 1、若目的基因的序列是已知的 用化学方法直接合成；PCR技术 2、若目的基因的序列是未知的 原核细胞：从基因文库中获取目的基因 真核细胞：反转录法 化学合成法（根据已知的氨基酸序列合成DNA法 ）： 根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。 蛋白质的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 结构基因的核苷酸序列 推测 推测 目的基因 化学合成 从基因文库中获取（鸟枪法）： 用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，让供体细胞提供的外源DNA的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制（即扩增），从中找出含有目的基因的细胞，再利用一定发方法将目的基因的DNA片段分离出来。 　用限制酶切断成许多片段 反转录法： 以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。 目的基因的mRNA 单链DNA(cDNA) 双链DNA (即目的基因) 反转录 合成 概念：PCR全称为_______________，是一项在生物____复制__________的核酸合成技术 聚合酶链式反应 体外 特定DNA片段 利用PCR技术扩增目的基因 原理： DNA复制 2、具体过程 PCR(多聚酶链式反应) PCR技术扩增与DNA复制的比较 碱基互补配对 四种脱氧核苷酸 模板、能量、酶 DNA在高温下变性解旋 解旋酶催化 体外复制 细胞核内 热稳定的DNA聚合酶 细胞内的DNA聚合酶 大量的DNA片段 形成整个DNA分子 PCR技术 DNA复制 相同点 原理 原料 条件 不同点 解旋方式 场所 酶 结果 2、形成重组DNA分子 ①用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个切口，露出黏性末端。 ②用同一种限制酶切断目的基因，使其产生同样的黏